Различают анти-А, анти-В и анти-АВ. Они представляют собой моноклональные, которые продуцируются двумя мыши­ными гибридомами, принадлежат к иммуноглобулинам класса М и предна­значены для определения группы крови человека по системе AB0. Цоликлоны изготавливаются из асцитической жидкости мышей - носителей анти-А и анти-В гибридом, являются строго специфичными и, следователь­но, не могут вызывать неспецифическую агглютинацию. Тех­нология приготовления реагента исключает возможность попадания в него патогенных для человека вирусов.

• Инструкция По Определению Группы Крови
• Инструкция По Определению Группы Крови Цоликлонами

Определение групп крови с помощью цоликлонов анти-А и анти-В.

Цоликлон анти-АВ представляет собой смесь моноклональных анти- А и анти-В антител. Цоликлоны выпускают в жидкой форме во флаконах по 5-10 мл. Цоликлоны анти-А подкрашены в красный цвет, анти-В - в си­ний, анти-АВ не подкрашивают, он остается бесцветным.

Срок хранения цоликлонов при температуре +2-8°С составляет два года, вскрытый флакон может храниться при той же температуре в течение одного месяца в за­крытом виде. Условия определения группы крови цоликлонами аналогичны опи­санным выше способам. На пластинку индивидуальными пипетками, под соответствующими надписями, наносят по одной большой капле (0,1 мл) цоликлонов анти-А, анти-В и анти-АВ. Рядом с каплями размещают по од­ной маленькой капле исследуемой крови (0,01-0,03 мл).

Затем проводят смешивание капель отдельными палочками. Наблюдают за ходом реакции в течение трех минут, хотя агглютинация может появиться через три - шесть секунд, но возможна и поздняя реакция, при наличии в эритроцитах слабых антигенов А или В. Результат реакции в каждой капле может быть положительным или отрицательным. Положительный результат выражается в агглютинации эритроцитов. Агглютинаты видны невооруженным глазом в виде мелких красных комочков, быстро сливающихся в крупные хлопья. При отрица­тельной реакции капля остается равномерно окрашенной в красный цвет, агглютинаты в ней не обнаруживаются. Интерпретация результатов реакции агглютинации крови с цоликлонами представлена в таблице 5.

Инструкция По Определению Группы Крови

1. На Студопедии вы можете прочитать про: Методика определения группы крови с помощью.
2. Процедура проведения исследования по определению группы крови с их помощью.
3. Инструкция К. Групп крови с помощью. Тестов по определению группы.

Определение группы крови с помощью цоликлонов Результат реакции с цоликлонами Исследуемая кровь принадлежит к группе Анти-А Анти-В Анти-АВ -0(I) + - + A(II) - + + B(III) + + + AB(IV) Оценка результатов исследования: 1. Отсутствие агглютинации во всех каплях свидетельствует о том, что в исследуемых эритроцитах нет А и В, и исследуемая кровь принадлежит к 0(I) группе. Наличие агглютинации в каплях с анти-А и анти-АВ свидетельствует о том, что в исследуемых эритроцитах имеется антиген А и кровь принадлежит к A(II) группе.

Наличие агглютинации в каплях с анти-В и анти-АВ свидетельствует о том, что в исследуемых эритроцитах имеется антиген В и кровь принадлежит к В (III) группе. Наличие агглютинации во всех каплях свидетельствует о том, что в исследуемых эритроцитах имеются оба антигена (А и В) и кровь при­надлежит к АВ(IV) группе.

В таких случаях необходимо исключить спонтанную неспецифическую агглютинацию исследуемых эритроци­тов. Для этого производят смешивание маленькой капли исследуемой крови с каплей изотонического раствора хлористого натрия (в соот­ношении 1:10) и, отдельно, проверяется реакция с сывороткой четвер­той группы крови. При отсутствии агглютинации эритроцитов в фи­зиологическом растворе и в сыворотке четвертой группы можно ут­верждать, что исследуемая кровь принадлежит к АВ(IV) группе.

Про­водить отдельно контроль с растворителем цоликлонов не требуется, поскольку в нем нет каких-либо добавок, способных вызвать агглю­тинацию эритроцитов.

Инструкция по определению иммунных антител групповой системы аво I. Введение Антитела системы АВО - альфа и бета являются нормальными (естественными) у человека. Они относятся к полным антителам - агглютининам, хорошо реагируют в солевой среде, лучше выявляются при комнатной температуре и хуже при температуре 37 град.

Инструкция По Определению Группы Крови Цоликлонами

Добавление в реакцию коллоидных веществ не усиливает активности этих антител, непрямой пробой Кумбса их не выявляют. Нормальные антитела альфа и бета легко абсорбируются из сыворотки при добавлении групповой субстанции Витебского. Они чувствительны к воздействию высокой температуры: прогревания при 70 град. С в течение десяти минут достаточно, чтобы эти антитела полностью потеряли активность. Кроме нормальных (естественных) антител альфа и бета у человека могут появиться еще иммунные антитела этой системы, которые в отличие от нормальных были обозначены символами анти-А и анти-В.

Иммунные антитела не присутствуют регулярно в крови людей, но могут возникнуть вследствие изоиммунизации при парентеральном поступлении в организм несовместимого в групповом отношении антигена, при иногруппной беременности, при ошибочном переливании крови, несовместимой по системе АВО, а также при проведении некоторых прививок и иммунизации. При иногруппной беременности, послужившей причиной гемолитической болезни плода, иммунные антитела анти-А или анти-В почти всегда присутствуют в крови матери к моменту рождения больного ребенка. При этом им обычно сопутствует высокий титр нормальных антител альфа и бета. При ошибочном переливании несовместимой крови иммунные антитела анти-А или анти-В появляются обычно на пятый-седьмой день, достигая максимума к пятнадцатому-двадцать пятому дню с последующим падением их титра. В крови у таких больных одновременно повышается титр нормальных антител альфа и бета на 3-8 ступеней также с последующим снижением после 25-30 дня. Иммунные антитела анти-А и анти-В могут быть как в полной, так и неполной форме. Они активны при 37 град.

С, могут иметь несколько более высокий титр при проведении реакции в коллоидной среде по сравнению с солевой и выявляться в непрямой пробе Кумбса. Иммунные антитела не абсорбируются при добавлении групповоспецифической субстанции Витебского. Они стойки к температурному воздействию и сохраняют активность при прогревании сыворотки в течение 10 минут при температуре 70 град. При условиях, при которых нормальные антитела альфа и бета полностью инактивируются. Выявление изоиммунных антител может служить ценным диагностическим признаком, в частности, при решении вопроса о причинах гемотрансфузионных осложнений и гемолитической болезни новорожденных.

Эти исследования рекомендуются для использования в практике. Наиболее демонстративным отличием нормальных антител альфа и бета от иммунных антител анти-А и анти-В является их поведение при воздействии высокой температуры.

На этих различиях и основано применение разных методов для выявления нормальных антител альфа и бета и изоиммунных антител анти-А и анти-В (см. Разделы II-V). Активность иммунных антител проявляется в виде способности вызывать агглютинацию эритроцитов при проведении реакции в солевой среде или, как конечный результат, в непрямой пробе Кумбса. Кроме этих антител, вследствие иммунизации, вызванной теми же причинами, могут одновременно образовываться гемолизины, которым свойственна также групповая специфичность (Методы определения групповых гемолизинов см. В разделах II, VI).